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江西提供溶瘤病毒检测技术指导 欢迎来电 迈杰转化医学供应

信息介绍 / Information introduction

    这一过程称为溶解。在此过程中,**细胞碎片被释放出来,并***人体自身的免疫系统。CAVATAK有几个重要的属性,包括:1.针对外部受体的靶标,优先在*细胞上过表达;2,江西提供溶瘤病毒检测技术指导.潜在应用于各种*症类型,包括前列腺*,肺*,黑色素瘤和膀胱*;3.通过三种给药途径(病灶内,江西提供溶瘤病毒检测技术指导,静脉内和膀胱内)的潜在应用开辟了应用于****症类型的潜力;4.低毒性,对患者的3级或更高不良事件水平低;5.与现有*症***的潜在协同作用,有临床前和早期临床证据表明,CAVATAK与下一代产品(如检查点抑制剂YERVOY和KEYTRUDA)结合使用可增加患者的临床益处;6.相对于更大的溶瘤病毒,江西提供溶瘤病毒检测技术指导,CAVATAK的小尺寸(25纳米)和无包膜性质使其能够在体内传播得更***;7.快速复制周期(6小时)可能利于更快速的响应。CAVATAK诱导的**微环境变化可以引起强烈的局部和全身抗**反应。这些变化包括免疫细胞浸润的增加和免疫检查点分子如PD-L1的上调。通过这些选择性的作用机制,该疗法提供更大的耐受性和疗效,为*症患者提供更好的临床益处和生活质量的希望,这些患者难以用当前的***方法***。Viralytics公司完成的2期CALM试验证明了CAVATAK作为晚期黑色素瘤患者的单一药物的疗效和耐受性。此外。迈杰中心实验室设有SLAN 96P、Rotor-Gene Q、ABI 7500、ABI ViiA7、Roche z480等实时荧光定量PCR仪及数字PCR仪!江西提供溶瘤病毒检测技术指导

    此处所描述的具体实施方式only用于说明和解释本公开,并不用于限制本公开。本公开提供一种利用类***检测溶瘤病毒有效性的方法,该方法包括:a、将溶瘤病毒与zhong刘类***混合培养12-96h,得到培养物,检测所述培养物中的溶瘤病毒的复制水平;b、将所述溶瘤病毒与zhong刘类***混合培养12-96h,得到第二培养物,检测所述第二培养物中溶瘤病毒对zhong刘细胞的杀伤率;c、将所述溶瘤病毒、免疫细胞和zhong刘类***混合培养2-8h,得到第三培养物,检测所述第三培养物中的细胞因子水平并计算所述溶瘤病毒的细胞因子促表达能力,所述细胞因子包括白细胞介素-2和/或γ-干扰素;如果待测溶瘤病毒的复制水平、对zhong刘细胞的杀伤率和细胞因子促表达能力均高于参比溶瘤病毒,则指示所述待测溶瘤病毒的有效性高于所述参比溶瘤病毒。本公开的发明人发现,现有的溶瘤病毒有效性检测方法检测得到的溶瘤病毒有效性数据与临床研究阶段得到的溶瘤病毒有效性数据存在较大差异的可能原因在于:现有的溶瘤病毒有效性检测方法中采用的zhong刘细胞模型无法真实模拟患者体内的zhong刘组织的生物学特性,导致现有的溶瘤病毒有效性检测过程无法真实模拟溶瘤病毒在患者体内的作用过程,例如。江西提供溶瘤病毒检测技术指导使用北欧免疫组化质控中心NordiQC推荐的IHC抗体组合。

    该方法包括:a、将溶瘤病毒与**类***混合培养12-96h,得到***培养物,检测所述***培养物中的溶瘤病毒的复制水平;b、将所述溶瘤病毒与**类***混合培养12-96h,得到第二培养物,检测所述第二培养物中溶瘤病毒对**细胞的杀伤率;c、将所述溶瘤病毒、免疫细胞和**类***混合培养2-8h,得到第三培养物,检测所述第三培养物中的细胞因子水平并计算所述溶瘤病毒的细胞因子促表达能力,所述细胞因子包括白细胞介素-2和/或γ-干扰素;如果待测溶瘤病毒的复制水平、对**细胞的杀伤率和细胞因子促表达能力均高于参比溶瘤病毒,则指示所述待测溶瘤病毒的有效性高于所述参比溶瘤病毒。本公开的发明人发现,现有的溶瘤病毒有效性检测方法检测得到的溶瘤病毒有效性数据与临床研究阶段得到的溶瘤病毒有效性数据存在较大差异的可能原因在于:现有的溶瘤病毒有效性检测方法中采用的**细胞模型无法真实模拟患者体内的**组织的生物学特性,导致现有的溶瘤病毒有效性检测过程无法真实模拟溶瘤病毒在患者体内的作用过程,例如,现有溶瘤病毒有效性检测方法中采用的由**细胞经2d培养得到的单层细胞系,其无法体现**异质性,也无法模拟患者体内的微环境,而且随着常规**细胞系传代代次的增加。

    所述glutamax的浓度为%、所述hepes的浓度为5-15mm、所述gastrin的浓度为5-15nm、所述nicotinamide的浓度为5-15mm、所述a83-01的浓度为250-600ng/ml、所述noggin的浓度为50-150ng/ml、所述n-acetylcysteine的浓度为、所述青链霉素的浓度为50-150μg/ml、所述egf的浓度为50-150ng/ml、所述bsa的浓度为。根据本公开,本公开涉及的**类***的制备方法可以是本领域常规的,例如,本公开所述**类***的制备方法包括:将**细胞、温敏性水凝胶和**类***培养液混合并进行培养,每隔2-4天更换一次培养基,直至显微镜下观察到直径不小于**类***。推荐地,在上述**类***的制备方法中,相对于20000个所述**细胞,所述温敏性水凝胶的用量可以为1500-2000μl,所述**类***培养液的用量可以为2000-3000μl。下面通过实施例来进一步说明本公开,但是本公开并不因此而受到任何限制。本公开实施例所涉及的原料、试剂、仪器和设备,如无特殊说明,均可通过购买获得。在本公开实施例中未注明具体实验温度时,实验温度均为室温(20-25℃)。本公开实施例中使用的试剂来源如下:dmem/f12培养基购于美国hyclone公司;cosmo温敏性水凝胶购于日本cosmobio公司;胎牛血清蛋白。迈杰转化医学基于基因组学、蛋白质组学、细胞组学及病理学等综合性转化医学全平台。

    可选地,所述生长因子中,所述glutamax的浓度为%、所述hepes的浓度为5-15mm、所述gastrin的浓度为5-15nm、所述nicotinamide的浓度为5-15mm、所述a83-01的浓度为250-600ng/ml、所述noggin的浓度为50-150ng/ml、所述n-acetylcysteine的浓度为、所述青链霉素的浓度为50-150μg/ml、所述egf的浓度为50-150ng/ml、所述bsa的浓度为。可选地,所述zhong刘类***的制备方法包括:将zhong刘细胞、温敏性水凝胶和zhong刘类***培养液混合并进行培养,每隔2-4天更换一次培养基,直至显微镜下观察到直径不小于zhong刘类***。可选地,相对于20000个所述zhong刘细胞,所述温敏性水凝胶的用量为1500-2000μl,所述zhong刘类***培养液的用量为2000-3000μl。通过上述技术方案,本公开的方法采用zhong刘类***作为溶瘤病毒有效性检测的zhong刘细胞模型,由于zhong刘类***能够较好地反映患者体内zhong刘组织的生物学特性,因此,本公开方法的检测结果能较真实地反映溶瘤病毒在患者体内对zhong刘组织溶瘤作用的有效性。本公开的其他特征和优点将在随后的具体实施方式部分予以详细说明。具体实施方式以下对本公开的具体实施方式进行详细说明。应当理解的是。迈杰转化医学希望能和创新型药企共同探索创新生物标志物的临床应用潜力。江西提供溶瘤病毒检测技术指导

迈杰转化医学目前已完成约30+靶点的方法学验证,50+靶点的方法学建立。江西提供溶瘤病毒检测技术指导

    zhong刘类***培养液的用量为2000-3000μl;将zhong刘类***与溶瘤病毒进行混合培养时,溶瘤病毒的用量为;步骤b中还包括将zhong刘类***进行第二预培养的步骤,然后再将第二预培养后的zhong刘类***与溶瘤病毒进行混合培养;所述第二预培养包括:将zhong刘类***与温敏性水凝胶、zhong刘类***培养液混合,培养12-96h,其中,相对于300-1000个zhong刘类***中的zhong刘细胞,温敏性水凝胶的用量为30-80μl,zhong刘类***培养液的用量为100-150μl;将zhong刘类***与溶瘤病毒进行混合培养时,溶瘤病毒的用量为;步骤c中,所述将溶瘤病毒、免疫细胞和zhong刘类***混合培养,包括:c1、将含有免疫细胞和zhong刘类***的细胞悬液接种在培养皿中,加入zhong刘类***培养液培养2-8h,得到混合培养液,其中所述细胞悬液中免疫细胞和zhong刘细胞的浓度为×107个/ml,免疫细胞:zhong刘类***细胞=(2-8):1,相对于,所述zhong刘类***培养液的用量为2-3ml;c2、将所述混合培养液与溶瘤病毒混合培养3-5h,所述溶瘤病毒的用量为1-100moi。根据本公开,步骤a中所述检测培养物中的溶瘤病毒的复制水平的方法可以是领域内常规的,能检测溶瘤病毒复制水平的方法均可用于本公开。江西提供溶瘤病毒检测技术指导

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